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赭曲霉毒素A免疫親和柱

產(chǎn)品名稱:赭曲霉毒素A免疫親和柱
產(chǎn)品品牌:HPSW
產(chǎn)品貨號:06993-2530
產(chǎn)品規(guī)格:3ml
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【概要】
赭曲霉毒素A (Ochratoxin A)是曲霉屬和青霉屬的真菌形成的次級代謝產(chǎn)物,屬烈性的腎臟毒和肝臟毒,廣泛存在于各種食物中,谷物及其副產(chǎn)品是赭曲霉毒素A的主要來源。動物實(shí)驗(yàn)表明攝入了被這種毒素污染的飼料后,會發(fā)生急性或慢性中毒癥。防止污染赭曲霉毒素A的食品和飼料直接或間接地進(jìn)入人類食物鏈,加強(qiáng)對赭曲霉毒素A的檢測十分重要。
 
【適用范圍及性能】
本公司真菌毒素免疫柱系列產(chǎn)品測試形式是一個(gè)高性能的免疫親和柱,設(shè)計(jì)用于在進(jìn)行 HPLC(高效液相色譜法)、GC-MS(氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián) 用 儀)、ELISA(酶聯(lián)免疫吸附劑測定)之前清理(凈化)或 濃縮樣本。
用于定性、定量檢測谷物、酒類等食品和飼料等樣本中的赭曲霉毒素A時(shí)的樣品前處理。
柱容量:≥400ng
回收率:≥90%
 
【試驗(yàn)原理】
本產(chǎn)品的測定的基礎(chǔ)是抗原抗體反應(yīng),赭曲霉毒素A單克隆抗體連接在柱內(nèi)凝膠上,樣品中的赭曲霉毒素A經(jīng)過提取、過濾、稀釋,然后將樣品提取液緩慢的通過赭曲霉毒素A免疫親和層析柱,在免疫親和柱內(nèi),赭曲霉毒素A與抗體結(jié)合,之后洗滌免疫親和柱除去沒有被結(jié)合的其他物質(zhì)。用甲醇洗脫赭曲霉毒素A,然后注入到分析儀器中用于檢測。
 
【包裝組成】
25支/盒,3mL柱管/支
產(chǎn)品說明書1份
 
【需要而未提供的設(shè)備及試劑】
設(shè)備:
┅┅高速均質(zhì)器或組織勻漿機(jī)
┅┅粉碎機(jī)
┅┅200ml/50ml量筒
┅┅天平:感量0.1g
┅┅微量移液器:單道 100ml~1000ml
┅┅槽紋濾紙(折疊快速定性或定量濾紙)
┅┅玻璃微纖維濾紙(1.5mm孔徑)
┅┅50ml漏斗
┅┅一次性玻璃試管
┅┅泵流操作架(包括空氣泵,不同容積的玻璃注射器等)
試劑
┅┅甲醇(色譜級)
┅┅蒸餾水或去離子水
┅┅pH7.0磷酸鹽緩沖溶液(PBS緩沖液):稱取8.0g氯化鈉,1.2g磷酸氫二鈉,0.2g磷酸二氫鉀,0.2g氯化鉀,用990mL純水溶解,然后用濃鹽酸調(diào)節(jié)pH值至7.0,最后用純水稀釋至1000mL
┅┅清洗緩沖液:25g 氯化鈉+5g碳酸氫鈉+0.1mL吐溫-20
   用純水稀釋至1000 mL
 
【試劑配制】
樣品提取液:配制甲醇-水(8:2)溶液作為樣品提取液
 
【樣本處理步驟】
(一)花生,玉米,大米,小麥及其制品和飼料
┅┅稱取20g粉碎的樣品于100mL容量瓶中,加入5.0g氯化鈉,以甲醇-水(8:2)溶液定容;
┅┅轉(zhuǎn)移到均質(zhì)杯中,以均質(zhì)器高速攪拌,提取2分鐘;
┅┅4000r/min離心5min或用定量濾紙過濾;
┅┅取10mL濾液并加入40mLPBS緩沖液稀釋,用玻璃微纖維濾紙過濾,取過濾后液體待測;
┅┅將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器;
┅┅將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約1滴/S流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過柱體;
┅┅以10.0mL清洗緩沖液淋洗柱子1次,流速為1滴-2滴/S,棄去全部流出液,
┅┅再以10.0mL水淋洗柱子1次,流速為1滴-2滴/S,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過柱體;
┅┅準(zhǔn)確加入1.0mL色譜級甲醇洗脫,流速為1 滴/S,收集全部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。
 
(二)啤酒,黃酒等酒類
┅┅取10mL試樣脫氣后與90mLPBS緩沖液混勻,用玻璃微纖維濾紙過濾,取過濾后液體待測;
┅┅將免疫親和柱連接于10.0mL玻璃注射器下。準(zhǔn)確移取10.0mL樣品提取液注入玻璃注射器;
┅┅將空氣壓力泵與玻璃注射器連接,調(diào)節(jié)壓力使溶液以約1滴/S流速緩慢通過免疫親和柱,直至2~3mL空氣通過柱體;
┅┅以10.0mL清洗緩沖液淋洗柱子1次,流速為1滴-2滴/S,棄去全部流出液,
┅┅再以10.0mL水淋洗柱子1次,流速為1滴-2滴/S,棄去全部流出液,并使2mL~3mL空氣通過柱體;
┅┅準(zhǔn)確加入1.0mL色譜級甲醇洗脫,流速為1 滴/S,收集全
   部洗脫液于玻璃試管中,供檢測用。
 
【結(jié)果判定】
經(jīng)免疫親和柱凈化后,收集到的甲醇洗脫液可直接使用熒光計(jì)或者HPLC檢測,也可使用薄層色譜或者酶聯(lián)免疫試劑盒進(jìn)行檢測。收集到的1ml洗脫液中的赭曲霉毒素A含量相當(dāng)于1g樣品中赭曲霉毒素A含量。
 
【注意事項(xiàng)】
┅┅赭曲霉毒素危害極大,應(yīng)戴手套操作。
┅┅不要使用過了有效日期的免疫親和柱。
 
【貯藏條件及保存期】
貯藏條件:親和柱2-8℃保存,不可凍存
保存期:該產(chǎn)品有效期為12個(gè)月。

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